Шам мен сабын жасауға арналған таза Saposhnikovia divaricata майы көтерме диффузор эфир майы қамыс оттығының диффузорларына арналған жаңа эфир майы

қысқаша сипаттама:

2.1. SDE дайындау

SD тамырсабақтары кептірілген шөп ретінде Hanherb Co.-дан (Гури, Корея) сатып алынды. Өсімдік материалдарын таксономиялық тұрғыдан Корея Шығыс медицина институтының (КИОМ) докторы Го-Я Чой растады. Ваучер үлгісі (нөмірі 2014 SDE-6) стандартты шөп ресурстарының кореялық гербарийінде сақталды. SD (320 г) кептірілген тамырсабақтары екі рет 70% этанолмен (2 сағаттық рефлюкспен) экстракцияланды, содан кейін сығынды төмендетілген қысымда концентратталды. Қайнатпа сүзгіден өткізіліп, лиофилденген және 4 ° C температурада сақталады. Шикі бастапқы материалдардан кептірілген сығындының шығымы 48,13% (w/w) құрады.

2.2. Сандық жоғары өнімділік сұйық хроматографиясы (HPLC) талдауы

Хроматографиялық талдау HPLC жүйесімен (Waters Co., Milford, MA, АҚШ) және фотодиод массивінің детекторымен орындалды. SDE HPLC талдауы үшін бастапқыO-glucosylcimifugin стандарты Кореяның дәстүрлі медицина индустриясын алға жылжыту институтынан (Кёнсан, Корея) сатып алынды жәнесек-О-глюкозилхамаудол және 4′-O-β-D-глюкозил-5-O-метилвисамминол біздің зертханада бөлініп алынды және спектрлік талдаулар арқылы, ең алдымен ЯМР және MS арқылы анықталды.

SDE үлгілері (0,1 мг) 70% этанолда (10 мл) ерітілді. Хроматографиялық бөлу XSelect HSS T3 C18 бағанымен (4,6 × 250 мм, 5) орындалды.μm, Waters Co., Milford, MA, АҚШ). Жылжымалы фаза ацетонитрилден (А) және судағы (B) 0,1% сірке қышқылынан 1,0 мл/мин ағын жылдамдығынан тұрды. Көп сатылы градиент бағдарламасы келесідей пайдаланылды: 5% A (0 мин), 5–20% A (0–10 мин), 20% A (10–23 мин) және 20–65% A (23–40 мин). ). Анықтау толқын ұзындығы 210–400 нм-де сканерленді және 254 нм-де жазылды. Инъекция көлемі 10,0 болдыμL. Үш хромонды анықтауға арналған стандартты ерітінділер 7,781 мг/мл соңғы концентрацияда дайындалды (прим-O-глюкозилцимифугин), 31,125 мг/мл (4′-O-β-D-глюкозил-5-O-метилвисамминол) және 31,125 мг/мл (сек-О-глюкозилхамаудол) метанолға салып, 4°С температурада ұстайды.

2.3. Қабынуға қарсы әрекетті бағалауIn Vitro

2.3.1. Жасуша мәдениеті және үлгіні өңдеу

RAW 264,7 жасушалар American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA, АҚШ) алынды және құрамында 1% антибиотиктер мен 5,5% FBS бар DMEM ортасында өсірілді. Жасушалар 37°C температурада 5% СО2 ылғалдандырылған атмосферада инкубацияланды. Жасушаларды ынталандыру үшін орта жаңа DMEM ортасымен және липополисахаридпен (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., Сент-Луис, МО, АҚШ) ауыстырылды.μSDE бар немесе жоқтығында г/мл қосылды (200 немесе 400μг/мл) қосымша 24 сағат.

2.3.2. Азот оксидін (NO), простагландин Е2 (PGE2), ісік некрозының факторын анықтауα(TNF-α), және Интерлейкин-6 (ИЛ-6) өндірісі

Жасушалар SDE-мен өңделді және 24 сағат бойы LPS-пен ынталандырылды. NO өндірісі алдыңғы зерттеуге сәйкес Griess реагентінің көмегімен нитритті өлшеу арқылы талданды.12]. Қабыну цитокиндерінің PGE2, TNF- секрециясыα, және IL-6 өндіруші нұсқауларына сәйкес ELISA жинағы (ҒЗТКЖ жүйелері) арқылы анықталды. SDE NO және цитокин өндірісіне әсері Wallac EnVision көмегімен 540 нм немесе 450 нм диапазонында анықталды.™микропластинаны оқу құрылғысы (PerkinElmer).

2.4. Антиостеоартриттің белсенділігін бағалауIn Vivo

2.4.1. Жануарлар

Еркек Sprague-Dawley егеуқұйрықтары (7 апталық) Samtako Inc. (Осан, Корея) компаниясынан сатып алынған және 12 сағаттық жарық/қараңғы циклмен бақыланатын жағдайларда орналастырылған.°C және% ылғалдылық. Егеуқұйрықтар зертханалық диета мен сумен қамтамасыз етілдіad libitum. Барлық эксперименттік процедуралар Ұлттық денсаулық институтының (NIH) нұсқауларына сәйкес орындалды және Деджон университетінің (Тэджон, Корея Республикасы) Жануарларды күту және пайдалану комитетімен мақұлданды.

2.4.2. Егеуқұйрықтарда MIA-мен ОА индукциясы

Жануарлар рандомизацияланған және зерттеу басталғанға дейін емдеу топтарына тағайындалған (топқа). ІІМ ерітіндісі (3 мг/50μL 0,9% физиологиялық ерітінді) кетамин мен ксилазин қоспасымен индукцияланған наркозбен оң жақ тізе буынының ішілік кеңістігіне тікелей енгізілді. Егеуқұйрықтар кездейсоқ түрде төрт топқа бөлінді: (1) ІІМ инъекциясы жоқ тұзды топ, (2) ЖІМ инъекциясы бар ЖІМ тобы, (3) ЖІМ инъекциясы бар SDE-мен өңделген топ (200 мг/кг) және (4) ) MIA инъекциясымен индометацинмен (ИМ-) өңделген топ (2 мг/кг). Егеуқұйрықтар 4 апта бойы ЖИА инъекциясынан 1 апта бұрын SDE және IM арқылы ауызша енгізілді. Осы зерттеуде пайдаланылған SDE және IM дозасы алдыңғы зерттеулерде қолданылғандарға негізделген [10,13,14].

2.4.3. Артқы аяқтың салмақты бөлу өлшемдері

ОА индукциясынан кейін артқы аяқтардың салмақ көтеру қабілетінің бастапқы тепе-теңдігі бұзылды. Салмақты көтеруге төзімділік өзгерістерін бағалау үшін жарамсыздықты сынаушы (Linton instrumentation, Норфолк, Ұлыбритания) пайдаланылды. Егеуқұйрықтар өлшеу камерасына мұқият орналастырылды. Артқы аяқтың салмақ түсіретін күші 3 секундтық кезеңде орташа алынған. Салмақ бөлу коэффициенті келесі теңдеу бойынша есептелді: [оң артқы аяқтағы салмақ/(оң артқы аяқтағы салмақ + сол жақ артқы аяқтағы салмақ)] × 100 [15].

2.4.4. Қан сарысуындағы цитокин деңгейін өлшеу

Қан үлгілері 4°C температурада 10 минут бойы 1500 г центрифугадан өтті; содан кейін сарысу жиналып, қолданылғанға дейін -70°C температурада сақталды. IL-1 деңгейлеріβ, IL-6, TNF-α, және сарысудағы PGE2 өндіруші нұсқауларына сәйкес R&D Systems (Миннеаполис, MN, АҚШ) фирмасының ELISA жинақтары арқылы өлшенді.

2.4.5. Нақты уақыттағы сандық RT-ПТР талдауы

Жалпы РНҚ TRI реагентінің® (Сигма-Олдрих, Сент-Луис, МО, АҚШ) көмегімен тізе буынының тінінен алынды, кері cDNA-ға транскрипцияланды және SYBR жасыл (Applied Biosystems) бар TM One Step RT ПТР жинағы арқылы ПТР күшейтілді. , Гранд-Айленд, Нью-Йорк, АҚШ). Нақты уақыттағы сандық ПТР Applied Biosystems 7500 Real-Time ПТР жүйесі (Applied Biosystems, Grand Island, NY, АҚШ) арқылы орындалды. Праймер тізбегі және зонд тізбегі Кестеде көрсетілген1. Үлгі cDNA-ларының аликвоталары және GAPDH cDNA-ның бірдей мөлшері өндірушінің нұсқауларына сәйкес құрамында ДНҚ полимеразасы бар TaqMan® әмбебап ПТР негізгі қоспасымен күшейтілді (Applied Biosystems, Foster, CA, АҚШ). ПТР шарттары 40 цикл үшін 50°C температурада 2 мин, 94°C температурада 10 минут, 95°C температурада 15 секунд және 60°C температурада 1 минут болды. Мақсатты геннің концентрациясы өндірушінің нұсқауларына сәйкес салыстырмалы Ct (күшейту сызбасы мен табалдырық арасындағы айқас нүктедегі шекті цикл саны) әдісі арқылы анықталды.

FOB бағасы:0,5 - 9 999 АҚШ доллары / Дана

Мин.Тапсырыс саны:100 дана/дана

Жабдықтау мүмкіндігі:Айына 10000 дана/дана

Бізге электрондық поштаны жіберіңіз

Өнімнің егжей-тегжейі

Өнім тегтері

Остеоартрит (ОА) егде жастағы адамдарда ең жиі кездесетін тірек-қимыл аппаратының ауруы және буындардың дегенеративті ауруы болып табылады.1]. ОА – ішінара жарақаттан, шеміршек құрылымы мен функциясының жоғалуынан, қабынуға қарсы және қабынуға қарсы жолдардың реттелуінің бұзылуынан болатын жағдай.2,3]. Ол, ең алдымен, буын шеміршектері мен синовиальды буындардың субхондральды сүйегіне әсер етеді және буындардың жеткіліксіздігіне әкеліп соғады, бұл салмақты көтеру кезінде, соның ішінде жүру және тұру кезінде ауырсынуға әкеледі.4].

ОА емі жоқ, өйткені шеміршекті жойылғаннан кейін оны қалпына келтіру өте қиын [5]. Емдеудің мақсаты - ауырсынуды жеңілдету, буындардың қозғалғыштығын сақтау немесе жақсарту, буындардың беріктігін арттыру және аурудың мүгедектік әсерін азайту. ОА-ның фармакологиялық емі науқастың буын қызметін және өмір сүру сапасын арттыру үшін ауырсынуды азайтуға бағытталған. Шеміршектің бұзылуы ОА-дағы негізгі оқиға болғанымен, коллагеннің ыдырауы қабынумен байланысты ОА-ның қайтымсыз прогрессиясын анықтайтын негізгі оқиға болып табылады.6,7]. Қабынуға қарсы және хондропротекторлық белсенділікпен емдеу ОА науқастарында ауырсынуды жеңілдетеді және матрицаның тұтастығын сақтайды деп күтілуде.

Сондықтан қабынуды азайту ОА емдеуде пайдалы болуы мүмкін. Жақында жүргізілген зерттеулер хондроциттердің қабынуын және шеміршектің одан әрі жойылуын жеңілдету тұрғысынан, олардың буындармен байланысты тіндермен әрекеттесу қабілеті арқылы ОА прогрессиясында шөп ресурстарының қорғаныш рөлін ұсынады, бұл буындардың ауырсынуын жеңілдетеді.8].

түбіріSaposhnikovia divaricataШищкин (Umbelliferae) Корея мен Қытайда бас ауруын, ауырсынуды, қабынуды және артритті емдеу үшін дәстүрлі медицинада кеңінен қолданылады.9,10]. Әртүрлі фармакологиялық әсерлеріSaposhnikovia divaricata(SD) сонымен қатар қабынуға қарсы, ауыруды басатын, қызуды түсіретін және артритке қарсы қасиеттерді қамтиды [9,11]. Жақында жүргізілген зерттеу коллаген тудырған артриттің тінтуір үлгісінде SD хромон сығындысының антиревматоидты артритке потенциалды әсерлері бар екенін көрсетті.10]; дегенмен, қабынуға қарсы және артритке қарсы белсенділігін қолдау үшін аздаған зерттеулер жүргізілдіSaposhnikovia divaricataүзінді (SDE).

Сондықтан, бұл зерттеу SD 70% этанол сығындысының қабынуға қарсы және антиостеоартритке қарсы белсенділігін зерттеді. Біріншіден, SDE қабынуға қарсы әсері бағаландыin vitroLPS-индукцияланған RAW 264,7 ұяшықтарында. Әрі қарай, SDE антиостеоартриттік әсері салмақты бөлуді, артикулярлық шеміршектің деградациясын және мононатрий йодоацетаты- (MIA-) индукцияланған OA егеуқұйрық үлгісіндегі қабыну реакцияларын бағалау арқылы өлшенді.