Остеоартрит (ОА) – 65 жастан асқан тұрғындарға әсер ететін созылмалы созылмалы дегенеративті сүйек буын ауруларының бірі.
1]. Әдетте, ОА пациенттеріне зақымдалған шеміршек, қабынған синовиум және эрозияланған хондроциттер диагнозы қойылады, бұл ауырсынуды және физикалық күйзелісті тудырады.
2]. Артрит ауруы негізінен буындардағы шеміршектің қабыну арқылы дегенерациясынан туындайды, ал шеміршек қатты зақымданған кезде сүйектер бір-бірімен соқтығысып, адам төзгісіз ауырсыну мен физикалық қиындықтарды тудыруы мүмкін.
3]. Ауырсыну, ісіну және буынның қаттылығы сияқты симптомдары бар қабыну медиаторларының қатысуы жақсы құжатталған. ОА бар науқастарда синовиальды сұйықтықта шеміршек пен субхондральды сүйектің эрозиясын тудыратын қабыну цитокиндері табылған.
4]. ОА бар науқастардың екі негізгі шағымы - ауырсыну және синовиальды қабыну. Сондықтан қазіргі ОА терапиясының негізгі мақсаттары ауырсыну мен қабынуды азайту болып табылады. [
5]. Стероидты емес және стероидты препараттарды қоса алғанда, қол жетімді OA емдеу әдістерінің ауырсыну мен қабынуды жеңілдетудегі тиімділігі дәлелденгенімен, бұл препараттарды ұзақ уақыт қолдану жүрек-қан тамырлары, асқазан-ішек және бүйрек дисфункциясы сияқты денсаулыққа ауыр зардаптарға әкеледі [
6]. Осылайша, артрозды емдеу үшін жанама әсерлері аз тиімдірек дәрі жасау керек.
Табиғи денсаулық өнімдері қауіпсіз және оңай қол жетімді болғандықтан танымал болып келеді [
7]. Дәстүрлі корей дәрілері бірнеше қабыну ауруларына, соның ішінде артритке қарсы тиімділігін дәлелдеді.
8]. Окландия лаппа DC. ауырсынуды жеңілдету және асқазанды тыныштандыру үшін Ци айналымын жақсарту сияқты емдік қасиеттерімен танымал және дәстүрлі түрде табиғи анальгетик ретінде қолданылған [
9]. Алдыңғы есептер A. lappa қабынуға қарсы [
10,
11], анальгетикалық [
12], ісікке қарсы [
13] және гастропротекторлық [
14] әсерлері. A. lappa-ның әртүрлі биологиялық белсенділігі оның негізгі белсенді қосылыстарымен байланысты: костунолид, дегидрокостос лактоны, дигидрокостунолид, косуслактон, α-костол, соуссуре лактоны және косуслактон [
15]. Бұрынғы зерттеулерде костунолид NF-kB және жылу соққысы ақуыз жолын реттеу арқылы макрофагтарды индукциялаған липополисахаридте (LPS) қабынуға қарсы қасиеттерді көрсетті деп мәлімдейді.
16,
17]. Дегенмен, ешбір зерттеу A. lappa-ның ОА емдеуге арналған әлеуетті белсенділігін зерттеген жоқ. Осы зерттеу A. lappa-ның OA-ға қарсы емдік әсерлерін (моносодий-йодацетатты) MIA және сірке қышқылымен индукцияланған кеміргіш модельдерін қолданып зерттеді.
Моносодиум-йодацетаты (МИА) жануарларда ауырсынудың көп бөлігін және ОА-ның патофизиологиялық ерекшеліктерін жасау үшін танымал.
18,
19,
20]. Тізе буындарына енгізген кезде, MIA хондроциттердің метаболизмін бұзады және қабыну мен қабыну белгілерін тудырады, мысалы, шеміршек пен субхондральды сүйек эрозиясы, ОА негізгі белгілері.
18]. Сірке қышқылымен индукцияланған итермелеу реакциясы жануарлардағы перифериялық ауырсынуды симуляциялау ретінде кеңінен қарастырылады, онда қабыну ауырсынуын сандық түрде өлшеуге болады.
19]. RAW264.7 тінтуір макрофагының жасушалық желісі қабынуға жасушалық жауаптарды зерттеу үшін кеңінен қолданылады. LPS көмегімен белсендірілгеннен кейін RAW264 макрофагтары қабыну жолдарын белсендіреді және TNF-α, COX-2, IL-1β, iNOS және IL-6 сияқты бірнеше қабыну делдалдарын шығарады.
20]. Бұл зерттеу MIA жануар үлгісінде, сірке қышқылымен индукцияланған жануар үлгісінде және LPS белсендірілген RAW264.7 жасушаларында A. lappa-ның антиноцицептивтік және қабынуға қарсы әсерлерін бағалады.
2. Материалдар мен әдістер
2.1. Өсімдік материалы
A. lappa DC кептірілген тамыры. экспериментте пайдаланылған Epulip Pharmaceutical Co., Ltd., (Сеул, Корея) компаниясынан сатып алынды. Оны Гачон университетінің корей медицинасының полковнигі, шөп фармакологиясы бөлімінің профессоры Донхун Ли анықтады және ваучер үлгісінің нөмірі 18060301 деп сақталды.
2.2. A. lappa сығындысының HPLC талдауы
A. lappa рефлюкс аппаратының көмегімен (дистильденген су, 100 °C 3 сағ) экстракцияланды. Алынған ерітінді төмен қысымды буландырғыштың көмегімен сүзіліп, конденсацияланды. A. lappa сығындысы -80 °C астында мұздату арқылы кептіргеннен кейін шығымы 44,69% болды. A. lappa хроматографиялық талдауы 1260 InfinityⅡ HPLC жүйесі (Agilent, Pal Alto, CA, АҚШ) арқылы жалғанған HPLC арқылы жүргізілді. Хроматикалық бөлу үшін EclipseXDB C18 бағаны (4,6 × 250 мм, 5 мкм, Agilent) 35 °C температурада пайдаланылды. Жалпы 100 мг үлгі 10 мл 50% метанолда сұйылтылған және 10 минут бойы ультрадыбыстық әсерге ұшыраған. Үлгілер 0,45 мкм шприц сүзгісімен (Waters Corp., Milford, MA, АҚШ) сүзілді. Жылжымалы фаза құрамы 0,1% фосфор қышқылы (А) және ацетонитрил (В) болды және баған келесідей элюцияланды: 0–60 мин, 0%; 60–65 мин, 100%; 65–67 мин, 100%; 67–72 мин, 0% еріткіш B ағынының жылдамдығы 1,0 мл/мин. Ағынды су 10 мкл инъекция көлемін пайдаланып 210 нм кезінде байқалды. Талдау үш данада орындалды.
2.3. Жануарларды ұстау және басқару
5 апталық еркек Sprague-Dawley (SD) егеуқұйрықтары және 6 апталық еркек ICR тышқандары Samtako Bio Korea (Кёнгидо, Корея) компаниясынан сатып алынды. Жануарлар тұрақты температура (22 ± 2 °C) және ылғалдылық (55 ± 10%) және 12/12 сағаттық жарық/қараңғы циклді қолданатын бөлмеде ұсталды. Жануарлар тәжірибе басталғанға дейін бір аптадан астам уақыт бойы жағдаймен танысты. Жануарларда азық пен судың ad libitum қоры болды. Гачон университетінде (GIACUC-R2019003) жануарларды күту мен ұстаудың қазіргі этикалық ережелері жануарларға арналған барлық эксперименттік процедураларда қатаң сақталды. Зерттеу тергеуші соқыр және параллельді сынақ ретінде жасалған. Біз жануарлардың эксперименттік этика комитетінің нұсқауларына сәйкес эвтаназия әдісін ұстандық.
2.4. MIA инъекция және емдеу
Егеуқұйрықтар кездейсоқ түрде 4 топқа бөлінді, атап айтқанда шам, бақылау, индометацин және A. lappa. 2% изофторан O2 қоспасымен жансыздандырылған егеуқұйрықтар тәжірибелік ОА-ға әкелу үшін 50 мкл MIA (40 мг/м; Сигма-Олдрих, Сент-Луис, МО, АҚШ) арқылы тізе буындарына инъекцияға енгізілді. Емдеу төмендегідей жүргізілді: бақылау және жалған топтар тек AIN-93G негізгі диетасымен ғана сақталды. Тек индометацин тобына AIN-93G диетасына енгізілген индометацин (3 мг/кг) және A. lappa 300 мг/кг тобына A. lappa (300 мг/кг) қосылған AIN-93G диетасына тағайындалды. Емдеу 190-210 г дене салмағына күнделікті 15-17 г мөлшерінде ОА индукцияланған күннен бастап 24 күн бойы жалғасты.
2.5. Салмақ көтеруді өлшеу
OA индукциясынан кейін егеуқұйрықтардың артқы аяқтарының салмақ көтеру қабілетін өлшеу жоспарланғандай incapacitance-MeterTester600 (IITC Life Science, Woodland Hills, CA, АҚШ) көмегімен орындалды. Артқы аяқтардағы салмақтың таралуы есептелді: салмақ көтеру қабілеті (%)
